微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物浓度、温度、水分、氧气、pＨ等。微生物的种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。通常分为：
1、一般培养法（需氧培养）
培养温度：25~37℃ 。
2、厌氧培养方法
①简易的厌氧培养法：
A、庖肉培养法
B、铁丝圈厌氧培养法
C、焦性没食子酸法
②厌氧罐法
③厌氧手套箱法
厌氧缸法：
厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养。
厌氧罐法：
装入待培养的对象，然后密闭罐盖，接着可采用抽真空→灌氮→抽真空→灌氮→抽真空→灌混合气（N2∶CO2∶H2=80∶10∶10，V/V）。
3、二氧化碳培养法
（1）烛缸法
（2）二氧化碳置换法
（3）化学法
每一升用重碳酸钠0.4克与浓盐酸0.35亳升加入。
（4）二氧化碳培养箱法
微生物常规鉴定技术
1、形态结构和培养特性观察
（1）在固体培养基上，观察：
菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等；
（2）在液体培养中：
表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等；
（3）半固体培养基穿刺接种：
观察运动、扩散情况。
2、染色镜检
（1）染色原理
由于微生物细胞含有大量水分，机体是无色透明的，与周围背景没有明显的反差， 须进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。
微生物中细菌、致病菌是很小的生物体，须通过染色的方法，在显微镜下才能看得清楚，并且还可以通过染色的方法鉴别革兰氏染色特性，以及是否长有鞭毛、周毛、荚膜和芽孢等。
（2）染色方法
①简单染色法
简单染色法又叫作普通染色法，只用一种染料使细菌染上颜色，观察细菌的形态。
②复染色法
用两种或多种染料染细菌，目的是为了鉴别不同性质的细菌，所以又叫鉴别染色法。主要的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法。
（3）革兰氏染色法
①原理
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。1884年由丹麦医师Gram创立。染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；
染色反应呈红色的称为革兰氏阴性细菌，用G―表示。
细菌对革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
②细菌的革兰氏染色步骤
涂片→干燥→固定→初染→水洗→媒染→水洗→脱色→水洗→复染→水洗→干燥→观察
A）取培养物分别做涂片、干燥、固定，方法均与简单染色的相同；
B）用草酸铵结晶紫染色1min后水洗；
C）加碘液媒染1min后水洗；
D）斜置载玻片，滴加95％乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30s，随即水洗；
E）用蕃红染液复染30s，水洗；
F）用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后用油镜观察，注意细菌细胞的颜色。
